الانتقال إلى المحتوى
NCI-H446
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الخلايا الصغيرة في الرئة
موقع الانتشار
الارتشاح الجنبي
المرادفات
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

المستندات

NCI-H446

Cell line · رقم المنتج 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
تم إنشاء هذا الخط الخلوي في عام 1982 على يد د. كارني وأ. ف. غازدار وزملائه من السائل الجنبي لمريض مصاب بسرطان الخلايا الصغيرة في الرئة. لم تكن مورفولوجيا الورم الأصلية مميزة لسرطان الرئة صغير الخلايا. خط الخلية هو نوع متغير من سرطان الرئة صغير الخلايا من حيث الكيمياء الحيوية والمورفولوجيا، ويعبر عن إنزيم الإنولاز المحدد للخلايا العصبية وكذلك إنزيم الدماغ المتساوي الإنزيم من الكرياتين كيناز. لم يتم اكتشاف أي من إنزيم L-DOPA decarboxylase أو بومبيسين أو فاسوبريسين أو أوكسيتوسين أو ببتيد إفراز الغاسترين في خط الخلية. يُظهر هذا الخط الخلوي درجة أعلى بـ 20 ضعفًا من تضخيم الحمض النووي c-myc ودرجة أعلى بـ 15 ضعفًا من الحمض النووي الريبي c-myc. تم تكاثر خط الخلية في الأصل في وسط RPMI 1640 الخالي من المصل والمضاف إليه 10 نانومتر من الهيدروكورتيزون، و5 ميكروغرام/مل من الأنسولين، و10 ميكروغرام/مل من الترانسفيرين، و10 نانومتر من 17 بيتا استراديول، و30 نانومتر من سيلينيت الصوديوم. يمكن أن تتكون الأورام القابلة للزرع مع أنسجة سرطان الرئة ذات الخلايا الصغيرة غير النمطية من الخلايا.
الأنسجة
الرئة
المرض
سرطان الخلايا الصغيرة في الرئة
موقع الانتشار
الارتشاح الجنبي
المرادفات
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارية الشبيهة بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية (تشكل الخلايا أورامًا قابلة للزرع مع أنسجة غير نمطية من سرطان القولون العصبي المزمن).

04المعرّفات

المرجع
NCI-H446 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305049)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1562

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10% من FBS، وأضف 2.5 جم/لتر جلوكوز، و10 ملي مولار هيبيس و1.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
61 عامًا
الأصل العرقي
أوروبي

قد تحتاج أيضًا إلى