Перейти до вмісту
NCI-H446
Тканина
Легені
Хвороба
Дрібноклітинна карцинома легень
Місце метастазування
Плевральний випіт
Синоніми
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

Документи

NCI-H446

Cell line · Номер товару 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис
Ця клітинна лінія була створена в 1982 році D. Carney, A.F. Gazdar і співробітниками з плевральної рідини пацієнта з недрібноклітинним раком легені. Початкова морфологія пухлини не була характерною для недрібноклітинного раку легенів. Клітинна лінія є варіантом недрібноклітинного раку легенів за біохімічними та морфологічними ознаками і експресує нейрон-специфічну енолазу, а також мозковий ізофермент креатинкінази. У клітинах цієї лінії не виявлено декарбоксилази L-DOPA, бомбезину, вазопресину, окситоцину або гастрин-рилізинг-пептиду. Ця клітинна лінія демонструє у 20 разів вищий ступінь ампліфікації ДНК c-myc та у 15 разів вищий ступінь ампліфікації РНК c-myc. Клітинну лінію спочатку розмножували в безсироватковому середовищі RPMI 1640, доповненому 10 нМ гідрокортизону, 5 мкг/мл інсуліну, 10 мкг/мл трансферину, 10 нМ 17-бета-естрадіолу та 30 нМ селеніту натрію. Клітини можуть утворювати трансплантовані пухлини з нетиповою гістологією дрібноклітинного раку легенів.
Тканина
Легені
Хвороба
Дрібноклітинна карцинома легень
Місце метастазування
Плевральний випіт
Синоніми
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей (клітини утворюють трансплантовані пухлини з нетиповою гістологією СКЛК).

04Ідентифікатори

Посилання
NCI-H446 (номер за каталогом Cytion 305049)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_1562

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Поповніть середовище 10% FBS, додайте 2,5 г/л глюкози, 10 мМ HEPES та 1,0 мМ пірувату натрію
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Зберіть суспензію клітин у пробірку на 15 мл і обережно відмийте прилиплі клітини PBS, що не містить кальцію і магнію (використовуйте 3-5 мл для колб T25 і 5-10 мл для колб T75). Нанесіть аккутазу (1-2 мл для колб Т25, 2,5 мл для колб Т75), забезпечуючи повне покриття клітинного шару. Інкубуйте клітини при кімнатній температурі протягом 10 хвилин. Після інкубації об'єднайте і центрифугуйте суспензію і прилиплі клітини. Після центрифугування обережно ресуспендуйте клітинну гранулу і перенесіть клітинну суспензію в нові колби зі свіжим середовищем.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
61 рік
Етнічна приналежність
Європейський

Вам також може знадобитися