.jpg)
- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Småcellscarcinom i lungan
- Metastaseringsställe
- Pleurautgjutning
- Synonymer
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokument
NCI-H446
Cell line · Produktnummer 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Anpassning / Rekommendationer
- NCI-H446Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
- Denna cellinje etablerades 1982 av D. Carney, A.F. Gazdar och medarbetare från pleuravätska från en patient med småcellig lungcancer. Den ursprungliga tumörmorfologin var inte karakteristisk för småcellig lungcancer. Cellinjen är en variant av småcellig lungcancer i biokemi och morfologi, och uttrycker neuronspecifikt enolas samt hjärnisoenzymet av kreatinkinas. Inget L-DOPA-dekarboxylas, bombesin, vasopressin, oxytocin eller gastrinfrisättande peptid har detekterats i cellinjen. Denna cellinje uppvisar en 20-faldigt högre grad av c-myc DNA-amplifiering och en 15-faldigt högre grad av c-myc RNA. Cellinjen förökades ursprungligen i serumfritt RPMI 1640-medium kompletterat med 10 nM hydrokortison, 5 mikrogram/ml insulin, 10 mikrogram/ml transferrin, 10 nM 17-beta-östradiol och 30 nM natriumselenit. Transplanterbara tumörer med icke-typisk småcellig lungcancerhistologi kan bildas av cellerna.
- Vävnad
- Lungan
- Sjukdom
- Småcellscarcinom i lungan
- Metastaseringsställe
- Pleurautgjutning
- Synonymer
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Tumörframkallande
- Ja, i nakna möss (cellerna bildar transplanterbara tumörer med icke-typisk SCLC-histologi).
04Identifierare
- Källa
- NCI-H446 (Cytion katalognummer 305049)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera med 10% FBS, tillsätt 2,5 g/L glukos, 10 mM HEPES och 1,0 mM natriumpyruvat
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Samla de suspenderade cellerna i ett 15 ml rör och tvätta försiktigt de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (använd 3-5 ml för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar). Applicera Accutase (1-2 ml för T25-kolvar, 2,5 ml för T75-kolvar) och se till att cellskiktet täcks helt. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Efter inkubationen, kombinera och centrifugera både suspensionen och de vidhäftande cellerna. Efter centrifugering, resuspendera försiktigt cellpelleten och överför cellsuspensionen till nya kolvar med nytt medium.
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Donatorns ålder
- 61 år
- Etnicitet
- Europeiska
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
