.jpg)
- Kude
- Kopsud
- Haigus
- Kopsu väikerakk-kartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Pleuraefusioon
- Sünonüümid
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumendid
NCI-H446
Cell line · Toote number 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Kohandamine / Soovitused
- NCI-H446Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
- See rakuliin loodi 1982. aastal D. Carney, A.F. Gazdari ja kaaslaste poolt väikse kopsuvähiga patsiendi pleura vedelikust. Esialgne kasvajamorfoloogia ei olnud väikse rakuga kopsuvähile iseloomulik. Rakuliin on biokeemiliselt ja morfoloogiliselt väikse kopsuvähi variant ning ekspresseerib neuronspetsiifilist enolaasi ja aju kreatiinkinaasi isoensüümi. Rakuliinis ei ole tuvastatud L-DOPA dekarboksülaasi, bombesiini, vasopressiini, oksütotsiini ega gastriini vabastavat peptiidi. Sellel rakuliinil on 20 korda suurem c-myc DNA amplifikatsioon ja 15 korda suurem c-myc RNA. Rakuliini paljundati algselt seerumivabas RPMI 1640 keskkonnas, millele lisati 10 nM hüdrokortisooni, 5 mikrogrammi/ml insuliini, 10 mikrogrammi/ml transferriini, 10 nM 17-beeta-östradiooli ja 30 nM naatriumseleniiti. Rakkudest võivad moodustuda mittetüüpilise väikse kopsuvähi histoloogiaga siirdatavad kasvajad.
- Kude
- Kopsud
- Haigus
- Kopsu väikerakk-kartsinoom
- Metastaaside asukoht
- Pleuraefusioon
- Sünonüümid
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Mees
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Tuumorigeenne
- Jah, alasti hiirtel (rakud moodustavad siirdamiskõlblikke kasvajaid, mille histoloogia on ebatüüpiline SCLC).
04Tunnused
- Viide
- NCI-H446 (Cytioni katalooginumber 305049)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga, lisada 2,5 g/l glükoosi, 10 mM HEPES ja 1,0 mM naatriumpüruvaati
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Doonori vanus
- 61 aastat
- Etniline kuuluvus
- Euroopa
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
.jpg)
.jpg)
.jpg)
