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- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Kleinzelliges Bronchialkarzinom
- Metastasenherd
- Pleuraerguss
- Synonyme
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumente
NCI-H446
Cell line · Artikelnummer 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Anpassung / Empfehlungen
- NCI-H446Cell line€430.00
Empfohlen (frischeste Charge)
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
- Diese Zelllinie wurde 1982 von D. Carney, A.F. Gazdar und Mitarbeitern aus der Pleuraflüssigkeit eines Patienten mit kleinzelligem Lungenkrebs hergestellt. Die ursprüngliche Tumormorphologie war nicht charakteristisch für kleinzelligen Lungenkrebs. Die Zelllinie ist in Biochemie und Morphologie eine Variante des kleinzelligen Lungenkrebses und exprimiert neuronenspezifische Enolase sowie das Hirnisoenzym der Kreatinkinase. In der Zelllinie wurde keine L-DOPA-Decarboxylase, kein Bombesin, Vasopressin, Oxytocin oder Gastrin freisetzendes Peptid nachgewiesen. Diese Zelllinie weist einen 20-fach höheren Grad an c-myc-DNA-Amplifikation und einen 15-fach höheren Grad an c-myc-RNA auf. Die Zelllinie wurde ursprünglich in serumfreiem RPMI 1640-Medium vermehrt, das mit 10 nM Hydrocortison, 5 Mikrogramm/ml Insulin, 10 Mikrogramm/ml Transferrin, 10 nM 17-beta-Östradiol und 30 nM Natriumselenit ergänzt wurde. Die Zellen können transplantierbare Tumore mit nicht-typischem kleinzelligem Lungenkrebs bilden.
- Gewebe
- Lunge
- Krankheit
- Kleinzelliges Bronchialkarzinom
- Metastasenherd
- Pleuraerguss
- Synonyme
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Männlich
- Wachstumseigenschaften
- Anhänger
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Tumorauslösend
- Ja, in Nacktmäusen (Die Zellen bilden transplantierbare Tumore mit untypischer SCLC-Histologie).
04Bezeichner
- Quellenangabe
- NCI-H446 (Cytion-Katalognummer 305049)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10 % FBS, fügen Sie 2,5 g/L Glukose, 10 mM HEPES und 1,0 mM Natriumpyruvat hinzu
- Dissoziationsreagenz
- Accutase
- Subkultivierung
- Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen.
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
07Spender
- Alter des Spenders
- 61 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Europäisch
08Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja
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