Skip to content
NCI-H446
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi tế bào nhỏ
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

Documents

NCI-H446

Cell line · Product number 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
Dòng tế bào này được thiết lập vào năm 1982 bởi D. Carney, A.F. Gazdar và các cộng sự từ dịch màng phổi của một bệnh nhân bị ung thư phổi tế bào nhỏ. Hình thái khối u ban đầu không đặc trưng cho ung thư phổi tế bào nhỏ. Dòng tế bào này là một biến thể của ung thư phổi tế bào nhỏ về sinh hóa và hình thái, và biểu hiện enolase đặc hiệu thần kinh cũng như isoenzyme não của creatine kinase. Không phát hiện thấy L-DOPA decarboxylase, bombesin, vasopressin, oxytocin hoặc peptid giải phóng gastrin trong dòng tế bào này. Dòng tế bào này có mức độ khuếch đại DNA c-myc cao gấp 20 lần và mức độ RNA c-myc cao gấp 15 lần. Dòng tế bào ban đầu được nuôi cấy trong môi trường RPMI 1640 không chứa huyết thanh, bổ sung 10 nM hydrocortisone, 5 microgam/mL insulin, 10 microgam/mL transferrin, 10 nM 17-beta-estradiol và 30 nM natri selenit. Các khối u có thể cấy ghép với mô học ung thư phổi tế bào nhỏ không điển hình có thể được hình thành từ các tế bào này.
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi tế bào nhỏ
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude (các tế bào hình thành khối u có thể cấy ghép với histology không điển hình của ung thư phổi tế bào nhỏ).

04Identifiers

Citation
NCI-H446 (Số catalog Cytion 305049)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1562

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường 10% huyết thanh bò (FBS), thêm 2,5 g/L glucose, 10 mM HEPES và 1,0 mM natri pyruvate
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Thu thập các tế bào treo lơ lửng vào ống 15 ml và nhẹ nhàng rửa các tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (sử dụng 3-5 ml cho bình T25 và 5-10 ml cho bình T75). Áp dụng Accutase (1-2 ml cho bình T25, 2,5 ml cho bình T75) đảm bảo phủ đều lớp tế bào. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Sau khi ủ, trộn và ly tâm cả tế bào treo lơ lửng và tế bào bám dính. Sau khi ly tâm, nhẹ nhàng hòa tan lại khối tế bào và chuyển hỗn hợp tế bào vào bình mới chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
61 năm
Ethnicity
Châu Âu