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- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma pulmonar de pequenas células
- Local da metástase
- Derrame pleural
- Sinónimos
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Documentos
NCI-H446
Cell line · Número do produto 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Personalização / Recomendações
- NCI-H446Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
- Esta linha celular foi criada em 1982 por D. Carney, A.F. Gazdar e colaboradores a partir do líquido pleural de um doente com cancro do pulmão de pequenas células. A morfologia original do tumor não era caraterística do cancro do pulmão de pequenas células. A linha celular é uma variante do cancro do pulmão de pequenas células em termos bioquímicos e morfológicos e exprime a enolase específica dos neurónios, bem como a isoenzima cerebral da creatina quinase. Não foi detectada na linha celular qualquer expressão de L-DOPA descarboxilase, bombesina, vasopressina, oxitocina ou péptido libertador de gastrina. Esta linha celular apresenta um grau 20 vezes mais elevado de amplificação do ADN c-myc e um grau 15 vezes mais elevado de ARN c-myc. A linha celular foi originalmente propagada em meio RPMI 1640 sem soro suplementado com 10 nM de hidrocortisona, 5 microgramas/mL de insulina, 10 microgramas/mL de transferrina, 10 nM de 17-beta-estradiol e 30 nM de selenito de sódio. As células podem formar tumores transplantáveis com histologia não típica de cancro do pulmão de pequenas células.
- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma pulmonar de pequenas células
- Local da metástase
- Derrame pleural
- Sinónimos
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Aderente
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, em ratinhos nus (As células formam tumores transplantáveis com histologia não típica de CPPC).
04Identificadores
- Referência
- NCI-H446 (número de catálogo Cytion 305049)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS, adicionar 2,5 g/L de glucose, 10 mM de HEPES e 1,0 mM de piruvato de sódio
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
07Doador
- Idade do dador
- 61 anos
- Etnia
- Europeu
08Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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