.jpg)
- Vev
- Lunge
- Sykdom
- Småcellet lungekarsinom
- Metastaseområde
- Pleuraeffusjon
- Synonymer
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumenter
NCI-H446
Cell line · Produktnummer 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCI-H446Cell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- Denne cellelinjen ble etablert i 1982 av D. Carney, A.F. Gazdar og medarbeidere fra pleuravæske fra en pasient med småcellet lungekreft. Den opprinnelige tumormorfologien var ikke karakteristisk for småcellet lungekreft. Cellelinjen er en variant av småcellet lungekreft i biokjemi og morfologi, og uttrykker nevronspesifikk enolase samt hjerne-isoenzymet av kreatinkinase. Det er ikke påvist L-DOPA-dekarboksylase, bombesin, vasopressin, oksytocin eller gastrinfrigjørende peptid i cellelinjen. Denne cellelinjen viser en 20 ganger høyere grad av c-myc DNA-amplifisering og en 15 ganger høyere grad av c-myc RNA. Cellelinjen ble opprinnelig oppformert i serumfritt RPMI 1640-medium supplert med 10 nM hydrokortison, 5 mikrogram/mL insulin, 10 mikrogram/mL transferrin, 10 nM 17-beta-østradiol og 30 nM natriumselenitt. Cellene kan danne transplanterbare svulster med ikke-typisk småcellet lungekrefthistologi.
- Vev
- Lunge
- Sykdom
- Småcellet lungekarsinom
- Metastaseområde
- Pleuraeffusjon
- Synonymer
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Tumorinduserende
- Ja, i nakne mus (cellene danner transplanterbare svulster med ikke-typisk SCLC-histologi).
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- NCI-H446 (Cytion-katalognummer 305049)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler med 10 % FBS, tilsett 2,5 g/L glukose, 10 mM HEPES og 1,0 mM natriumpyruvat
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Samle suspensjonscellene i et 15 ml rør, og vask de adherente cellene forsiktig med PBS uten kalsium og magnesium (bruk 3-5 ml for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml for T25-kolber, 2,5 ml for T75-kolber) og sørg for full dekning av cellelaget. La cellene inkubere i romtemperatur i 10 minutter. Etter inkubasjon kombineres og sentrifugeres både suspensjonen og de adherente cellene. Etter sentrifugering resuspenderes cellepelleten forsiktig, og cellesuspensjonen overføres til nye kolber som inneholder nytt medium.
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
07Donor
- Donorens alder
- 61 år
- Etnisitet
- Europeisk
08Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
