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- Pañuelo de papel
- Pulmón
- Enfermedad
- Carcinoma pulmonar de células pequeñas
- Lugar de metástasis
- Derrame pleural
- Sinónimos
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Documentos
NCI-H446
Cell line · Número de producto 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Personalización / Recomendaciones
- NCI-H446Cell line€430.00
Recomendado (lote más fresco)
01Información general
- Descripción
- Esta línea celular fue creada en 1982 por D. Carney, A.F. Gazdar y asociados a partir del líquido pleural de un paciente con cáncer de pulmón de células pequeñas. La morfología original del tumor no era característica del cáncer de pulmón de células pequeñas. La línea celular es una variante de cáncer de pulmón de células pequeñas en bioquímica y morfología, y expresa enolasa específica de neuronas, así como la isoenzima cerebral de la creatina quinasa. No se ha detectado en la línea celular L-DOPA descarboxilasa, bombesina, vasopresina, oxitocina ni péptido liberador de gastrina. Esta línea celular presenta un grado 20 veces mayor de amplificación de ADN c-myc y un grado 15 veces mayor de ARN c-myc. La línea celular se propagó originalmente en medio RPMI 1640 libre de suero y suplementado con 10 nM de hidrocortisona, 5 microgramos/mL de insulina, 10 microgramos/mL de transferrina, 10 nM de 17-beta-estradiol y 30 nM de selenito sódico. Las células pueden formar tumores transplantables con histología de cáncer de pulmón de células pequeñas no típico.
- Pañuelo de papel
- Pulmón
- Enfermedad
- Carcinoma pulmonar de células pequeñas
- Lugar de metástasis
- Derrame pleural
- Sinónimos
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Clasificación
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Hombre
- Propiedades de crecimiento
- Adherente
- Nivel de bioseguridad
- 1
03Características
- Morfología
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sí, en ratones desnudos (las células forman tumores transplantables con histología de CPCP no típica).
04Identificadores
- Referencia
- NCI-H446 (número de catálogo de Cytion 305049)
- N.º de identificación fiscal del NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Manejo y cultivo
- Medio de cultivo
- RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
- Atmósfera de incubación
37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.
- Suplementos
- Completar el medio con un 10% de FBS, añadir 2,5 g/L de glucosa, 10 mM de HEPES y 1,0 mM de piruvato sódico
- Reactivo de disociación
- Accutase
- Subcultivo
- Reunir las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lavar suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilizar 3-5 ml para matraces T25 y 5-10 ml para matraces T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para matraces T25, 2,5 ml para matraces T75) asegurando la cobertura completa de la capa celular. Dejar incubar las células a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combinar y centrifugar tanto la suspensión como las células adherentes. Tras la centrifugación, resuspender cuidadosamente el sedimento celular y transferir la suspensión celular a nuevos matraces que contengan medio fresco.
- Renovación de fluidos
- de 2 a 3 veces por semana
- Descongelación y cultivo
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Control de calidad y criopreservación
- Esterilidad
La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.
Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Medio de congelación
- Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
- Condiciones de almacenamiento
Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.
- Condiciones de envío
Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.
07Donante
- Edad del donante
- 61 años
- Origen étnico
- Europea
08Aspectos legales y de seguridad
- Medidas de seguridad
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su futura descongelación, es obligatorio cumplir estrictas medidas de seguridad. Es esencial utilizar guantes y ropa de protección adecuados, así como una mascarilla o gafas de seguridad durante el traslado de muestras congeladas desde o hacia el tanque de nitrógeno líquido. Con ello se pretende mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones crioviales al extraerlas, que pueden dar lugar a la proyección de fragmentos afilados.
- Garantía
En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto
Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía
- Se requiere un acuerdo de transferencia de material
- Sí
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