.jpg)
- Tkanivo
- Pľúca
- Choroba
- Malobunkový karcinóm pľúc
- Miesto metastáz
- Pleurálna efúzia
- Synonymá
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumenty
NCI-H446
Cell line · Číslo výrobku 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Prispôsobenie / Odporúčania
- NCI-H446Cell line€430.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
- Túto bunkovú líniu vytvorili v roku 1982 D. Carney, A.F. Gazdar a spolupracovníci z pleurálnej tekutiny pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Pôvodná morfológia nádoru nebola charakteristická pre malobunkový karcinóm pľúc. Bunková línia je biochemicky a morfologicky variantom malobunkového karcinómu pľúc a exprimuje neuronálne špecifickú enolázu, ako aj mozgový izoenzým kreatínkinázy. V bunkovej línii sa nezistil žiadny L-DOPA dekarboxyláza, bombesín, vazopresín, oxytocín ani peptid uvoľňujúci gastrín. Táto bunková línia vykazuje 20-násobne vyšší stupeň amplifikácie c-myc DNA a 15-násobne vyšší stupeň c-myc RNA. Bunková línia bola pôvodne množená v médiu RPMI 1640 bez séra doplnenom o 10 nM hydrokortizónu, 5 mikrogramov/ml inzulínu, 10 mikrogramov/ml transferínu, 10 nM 17-beta-estradiolu a 30 nM seleničitanu sodného. Bunky môžu tvoriť transplantovateľné nádory s netypickou histológiou malobunkového karcinómu pľúc.
- Tkanivo
- Pľúca
- Choroba
- Malobunkový karcinóm pľúc
- Miesto metastáz
- Pleurálna efúzia
- Synonymá
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Muž
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelom podobné
- Tumorigenický
- Áno, na nahých myšiach (bunky tvoria transplantovateľné nádory s netypickou histológiou SCLC).
04Identifikátory
- Citácia
- NCI-H446 (katalógové číslo Cytion 305049)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS, pridajte 2,5 g/l glukózy, 10 mM HEPES a 1,0 mM pyruvát sodný
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
07Darca
- Vek darcu
- 61 rokov
- Etnická príslušnosť
- Európska
08Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno
.jpg)
.jpg)
.jpg)
