Skip to content
NCI-H446
Tissue
ריאה
Disease
קרצינומה של תאים קטנים בריאות
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

Documents

NCI-H446

Cell line · Product number 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
קו תאים זה הוקם בשנת 1982 על ידי D. Carney, A.F. Gazdar ועמיתיהם מנוזל פלאורלי של חולה עם סרטן ריאות תאים קטנים. המורפולוגיה המקורית של הגידול לא הייתה אופיינית לסרטן ריאות תאים קטנים. קו התאים הוא וריאנט של סרטן ריאות תאים קטנים מבחינה ביוכימית ומורפולוגית, ומבטא אנולאז ספציפי לנוירונים וכן איזואנזים מוחי של קריאטין קינאז. לא זוהו L-DOPA דקרבוקסילאז, בומבסין, וזופרסין, אוקסיטוצין או פפטיד משחרר גסטרין בקו התאים. קו תאים זה מציג רמה גבוהה פי 20 של הגברת DNA c-myc ורמה גבוהה פי 15 של RNA c-myc. קו התאים הושבב במקור במדיום RPMI 1640 נטול סרום, בתוספת 10 ננומטר הידרוקורטיזון, 5 מיקרוגרם/מ"ל אינסולין, 10 מיקרוגרם/מ"ל טרנספרין, 10 ננומטר 17-beta-estradiol ו-30 ננומטר סלניט נתרן. התאים יכולים ליצור גידולים הניתנים להשתלה עם היסטולוגיה לא טיפוסית של סרטן ריאות תאים קטנים.
Tissue
ריאה
Disease
קרצינומה של תאים קטנים בריאות
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים (התאים יוצרים גידולים הניתנים להשתלה עם היסטולוגיה לא טיפוסית של SCLC).

04Identifiers

Citation
NCI-H446 (מספר קטלוגי Cytion 305049)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1562

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז, 10 מ"מ HEPES ו-1.0 מ"מ נתרן פירובט
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
61 שנים
Ethnicity
אירופאי