.jpg)
- Weefsel
- Long
- Ziekte
- Longkleincellig carcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Pleurale Effusie
- Synoniemen
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Documenten
NCI-H446
Cell line · Productnummer 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Maatwerk / Aanbevelingen
- NCI-H446Cell line€430.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
- Deze cellijn werd in 1982 door D. Carney, A.F. Gazdar en medewerkers ontwikkeld uit het pleuravocht van een patiënt met kleincellige longkanker. De oorspronkelijke tumormorfologie was niet karakteristiek voor kleincellige longkanker. De cellijn is qua biochemie en morfologie een variant van kleincellige longkanker en brengt neuronspecifieke enolase tot expressie, evenals het hersenisoenzym creatinekinase. Geen van L-DOPA decarboxylase, bombesine, vasopressine, oxytocine of gastrine releasing peptide is gedetecteerd in de cellijn. Deze cellijn vertoont een 20-voudig hogere graad van c-myc DNA amplificatie en een 15-voudig hogere graad van c-myc RNA. De cellijn werd oorspronkelijk gekweekt in serumvrij RPMI 1640 medium aangevuld met 10 nM hydrocortison, 5 microgram/mL insuline, 10 microgram/mL transferrine, 10 nM 17-beta-estradiol en 30 nM natriumseleniet. De cellen kunnen transplanteerbare tumoren vormen met een niet-typische histologie van kleincellige longkanker.
- Weefsel
- Long
- Ziekte
- Longkleincellig carcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Pleurale Effusie
- Synoniemen
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Tumorverwekkend
- Ja, in naakte muizen (de cellen vormen transplanteerbare tumoren met een niet-typische histologie van SCLC).
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- NCI-H446 (Cytion catalogusnummer 305049)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS, voeg 2,5 g/L glucose, 10 mM HEPES en 1,0 mM natriumpyruvaat toe
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen combineren en centrifugeren. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
07Donateur
- Leeftijd van de donor
- 61 jaar
- Etnische afkomst
- Europese
08Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja
.jpg)
.jpg)
.jpg)
