.jpg)
- Tessuto
- Polmone
- Malattia
- Carcinoma polmonare a piccole cellule
- Sito metastatico
- Effusione pleurica
- Sinonimi
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Documenti
NCI-H446
Cell line · Codice prodotto 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Personalizzazione / Suggerimenti
- NCI-H446Cell line€430.00
Consigliati (partita più recente)
01Informazioni generali
- Descrizione
- Questa linea cellulare è stata creata nel 1982 da D. Carney, A.F. Gazdar e collaboratori a partire dal liquido pleurico di un paziente con tumore polmonare a piccole cellule. La morfologia originale del tumore non era caratteristica del carcinoma polmonare a piccole cellule. La linea cellulare è una variante del carcinoma polmonare a piccole cellule per biochimica e morfologia ed esprime l'enolasi specifica dei neuroni e l'isoenzima cerebrale della creatina chinasi. Nella linea cellulare non è stata rilevata alcuna L-DOPA decarbossilasi, bombesina, vasopressina, ossitocina o peptide di rilascio della gastrina. Questa linea cellulare presenta un grado di amplificazione del DNA di c-myc 20 volte superiore e un grado di RNA di c-myc 15 volte superiore. La linea cellulare è stata originariamente propagata in terreno RPMI 1640 privo di siero e integrato con 10 nM di idrocortisone, 5 microgrammi/mL di insulina, 10 microgrammi/mL di transferrina, 10 nM di 17-beta-estradiolo e 30 nM di selenito di sodio. Le cellule possono formare tumori trapiantabili con istologia di carcinoma polmonare a piccole cellule non tipico.
- Tessuto
- Polmone
- Malattia
- Carcinoma polmonare a piccole cellule
- Sito metastatico
- Effusione pleurica
- Sinonimi
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Classificazione
- Organismo
- Umano
- Sesso
- Maschio
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Tumorigenico
- Sì, in topi nudi (le cellule formano tumori trapiantabili con istologia SCLC non tipica).
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- NCI-H446 (catalogo Cytion numero 305049)
- Codice fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno con il 10% di FBS, aggiungere 2,5 g/L di glucosio, 10 mM di HEPES e 1,0 mM di piruvato di sodio
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
07Donatore
- Età dei donatori
- 61 anni
- Etnia
- Europeo
08Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
.jpg)
.jpg)
.jpg)
