.jpg)
- Tkivo
- Pljuča
- Bolezen
- Drobnocelični karcinom pljuč
- Mesto metastaze
- Plevralni izliv
- Sinonimi
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Dokumenti
NCI-H446
Cell line · Številka izdelka 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Prilagajanje / Priporočila
- NCI-H446Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- To celično linijo so leta 1982 D. Carney, A. F. Gazdar in sodelavci ustvarili iz plevralne tekočine bolnika z drobnoceličnim rakom pljuč. Prvotna morfologija tumorja ni bila značilna za drobnocelični rak pljuč. Celična linija je po biokemiji in morfologiji varianta drobnoceličnega pljučnega raka in izraža nevronsko specifično enolazo ter možganski izoencim kreatin kinaze. V celični liniji niso odkrili L-DOPA dekarboksilaze, bombesina, vazopresina, oksitocina ali peptida, ki sprošča gastrin. Ta celična linija ima 20-krat višjo stopnjo amplifikacije DNK c-myc in 15-krat višjo stopnjo RNK c-myc. Celična linija je bila prvotno razmnožena v gojišču RPMI 1640 brez seruma, dopolnjenem z 10 nM hidrokortizona, 5 mikrogramov/ml inzulina, 10 mikrogramov/ml transferina, 10 nM 17-beta-estradiola in 30 nM natrijevega selenita. Celice lahko tvorijo presadljive tumorje z netipičnim drobnoceličnim pljučnim rakom.
- Tkivo
- Pljuča
- Bolezen
- Drobnocelični karcinom pljuč
- Mesto metastaze
- Plevralni izliv
- Sinonimi
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijsko podobni
- Tumorigeničen
- Da, pri golih miših (celice tvorijo tumorje za presaditev z netipično histologijo SCLC).
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- NCI-H446 (kataloška številka Cytion 305049)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišču dodajte 10 % FBS, 2,5 g/l glukoze, 10 mM HEPES in 1,0 mM natrijevega piruvata
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
07Donator
- Starost darovalca
- 61 let
- Etnična pripadnost
- Evropski
08Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
.jpg)
.jpg)
.jpg)
