.jpg)
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
- Metastatic site
- น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
- Synonyms
- NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446
Documents
NCI-H446
Cell line · Product number 305049
This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...
Customization / Recommendations
- NCI-H446Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
- เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นในปี 1982 โดย D. Carney, A.F. Gazdar และคณะ จากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเนื้องอกต้นกำเนิดไม่ได้มีลักษณะเฉพาะของมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก เซลล์ไลน์นี้เป็นมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็กชนิดแปรผันในด้านชีวเคมีและสัณฐานวิทยา และแสดงออกของเอนไซม์เอนอลาสเฉพาะของเซลล์ประสาท (neuron specific enolase) รวมถึงไอโซเอนไซม์ของครีเอทีฟฟอสโฟเคนซิน (creatine kinase) ชนิดสมองไม่พบ L-DOPA decarboxylase, bombesin, vasopressin, oxytocin หรือ gastrin releasing peptide ในเซลล์ไลน์นี้ เซลล์ไลน์นี้แสดงระดับการเพิ่มจำนวนของ c-myc DNA สูงกว่า 20 เท่า และระดับ c-myc RNA สูงกว่า 15 เท่าเซลล์ไลน์นี้ถูกเพาะเลี้ยงครั้งแรกในอาหารเลี้ยงเซลล์ RPMI 1640 ที่ปราศจากเซรั่ม โดยเติมไฮโดรคอร์ติโซน 10 นาโนโมลาร์, อินซูลิน 5 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, ทรานส์เฟอริน 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, 17-เบต้า-เอสตราไดออล 10 นาโนโมลาร์ และโซเดียมซีลีไนต์ 30 นาโนโมลาร์ สามารถสร้างเนื้องอกที่สามารถปลูกถ่ายได้ซึ่งมีลักษณะทางจุลทรรศน์ของมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็กที่ไม่เป็นแบบแผนจากเซลล์เหล่านี้
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
- Metastatic site
- น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
- Synonyms
- NCI-H446
- H-446
- NCI-446
- NCIH446
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน (เซลล์ก่อตัวเป็นเนื้องอกที่สามารถปลูกถ่ายได้ โดยมีลักษณะทางจุลทรรศน์ของ SCLC ที่ไม่ปกติ)
04Identifiers
- Citation
- NCI-H446 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305049)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1562
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, เติมกลูโคส 2.5 กรัม/ลิตร, HEPES 10 มิลลิโมลาร์ และโซเดียมไพรูเวต 1.0 มิลลิโมลาร์
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Donor age
- 61 ปี
- Ethnicity
- ยุโรป
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
.jpg)
.jpg)
