Tartalomra ugrás
NCI-H446
Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Pleura folyadékgyülem
Szinonimák
NCI-H446, H-446, NCI-446, NCIH446

Dokumentumok

NCI-H446

Cell line · Termékszám 305049

This cell line was established in 1982 by D. Carney, A.F. Gazdar and associates from the pleural fluid of a patient with small cell cancer of the lung. The o...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Ezt a sejtvonalat 1982-ben D. Carney, A.F. Gazdar és munkatársai hozták létre egy kissejtes tüdőrákban szenvedő beteg mellhártyájának folyadékából. Az eredeti tumormorfológia nem volt jellemző a kissejtes tüdőrákra. A sejtvonal biokémiai és morfológiai szempontból a kissejtes tüdőrák variánsának felel meg, és expresszálja a neuronspecifikus enolázt, valamint a kreatin-kináz agyi izoenzimét. A sejtvonalban nem mutatták ki az L-DOPA dekarboxiláz, a bombesin, a vazopresszin, az oxitocin vagy a gasztrin felszabadító peptid egyikét sem. Ebben a sejtvonalban 20-szoros a c-myc DNS-amplifikáció és 15-szörös a c-myc RNS-amplifikáció mértéke. A sejtvonalat eredetileg 10 nM hidrokortizon, 5 mikrogramm/ml inzulin, 10 mikrogramm/ml transzferrin, 10 nM 17-béta-ösztradiol és 30 nM nátrium-szelenit tartalmú szérummentes RPMI 1640-es tápfolyadékban szaporították. A sejtekből nem tipikus kissejtes tüdőrák szövettanú transzplantálható tumorok képződhetnek.
Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Pleura folyadékgyülem
Szinonimák
  • NCI-H446
  • H-446
  • NCI-446
  • NCIH446

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, meztelen egerekben (a sejtek nem tipikus SCLC szövettani felépítésű, transzplantálható tumorokat képeznek).

04Azonosítók

Hivatkozás
NCI-H446 (Cytion katalógusszám: 305049)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1562

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel, adjunk hozzá 2,5 g/l glükózt, 10 mM HEPES-t és 1,0 mM nátrium-piruvátot
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
61 év
Etnikai hovatartozás
Európai