Sissejuhatus

See 3T6-Šveitsi albiino rakud, mida tuntakse ka nimetuste Swiss 3T6, NIH 3T6, 3T6 ja GM05862 all, on üks pikaealisemaid spontaanselt surematuks muutunud hiire fibroblastide rakuliine biomeditsiinilises uurimistöös. Selle liini asutasid 1963. aastal Todaro ja Green lagunenud Šveitsi hiire embrüotest ning see oli üks esimesi, mis tõestas, et primaarsed hiire embrüo rakud võivad määratletud passaažitingimustes spontaanselt surematuks muutuda. [1]. Järgnevate aastakümnete jooksul on teadlased kasutanud 3T6-Swiss-albiino rakke märkimisväärselt laias valikus teadusharudes, sealhulgas viroloogias, DNA-paranduses, nukleotiidide ainevahetuses, retseptoribioloogias ja biomaterjalide hindamises. Selle rakuliini kiire kahekordistumisaeg, tugevad kasvukarakteristikud ja fibroblastlik morfoloogia muudavad selle eksperimentaalselt hõlpsasti käsitletavaks mudeliks. Tema hästi iseloomustatud reageerimisvõime kasvufaktoritele ja mitogeenidele on muutnud selle ka eelistatud vahendiks signaaliülekande ja rakutsükli regulatsiooni uurimiseks nii mittetransformeeritud kui ka spontaanselt transformeeritud fibroblastide taustal.

Peamised järeldused

• 3T6-Swiss albino on spontaanselt surematuks muudetud hiire fibroblastide rakuliin, mille Todaro ja Green lõid 1963. aastal Šveitsi hiire embrüotest.
• Sellel rakuliinil on Cellosaurus’e registreerimisnumber CVCL_0601 ning selle rakkude kahekordistumisaeg on erakordselt lühike – umbes 15 tundi.
• Tähis „3T6” viitab selle saamiseks kasutatud kultiveerimisrežiimile: ülekandmine iga 3 päeva tagant, kasutades inokulaati 6 × 10⁵ rakud plaadi kohta.
• Seda on laialdaselt kasutatud viroloogilistes uuringutes, eelkõige polüomaviiruse transkriptsiooni, replikatsiooni ja kapsidivalkude uurimisel.
• See rakuliin on usaldusväärne mudel DNA parandusmehhanismide, kasvufaktorite signaalimise ja nukleotiidide biosünteesi uurimiseks.
• 3T6-Swiss-albino rakud on vastuvõtlikud rakusisestele bakteriaalsetele nakkustele, mistõttu sobivad need hästi peremees-patogeeni vastastikmõju uuringuteks.
• Seda rakuliini on valideeritud bioloogilise sobivuse ja tsütotoksilisuse testide jaoks biomaterjalide ja haavade paranemise alases uurimistöös.

Mis on 3T6-Swiss albino?

3T6-Swiss albino (CVCL_0601) on saadud Šveitsi albiino hiirte tervetest embrüokudedest; Cellosaurus märgib selle liini sooks isane. Algkultuurid valmistati 17–19 päeva vanuste Šveitsi hiirte embrüote segust, seega ei ole liini päritolu võimalik jälgida ühegi kindlaksmääratud doonorloomani [1]. Rakuliin loodi Todaro ja Greeni väljatöötatud klassikalise 3T-protokolli abil, mille raames hiire primaarseid embrüonaalrakke paljundati järjestikku kindlate ajavahemike ja inokuleerimistihedustega, kuni toimus spontaanne immortalisatsioon. Nimetus viitab sellele režiimile otseselt: „3T“ tähistab ülekandmist kolmepäevaste intervallidega ning teine number tähistab inokulaati ühikutes 10⁵ rakku plaadi kohta. Seega hoiti 3T6-rakke kontsentratsioonil 6 × 10⁵ rakke plaadi kohta, koos sõsarliinidega 3T3 (3 × 10⁵) ja 3T12 (12 × 10⁵) mida on kirjeldatud samas uuringus [1].

Kasvatamise käigus kasutatud kultiveerimistingimused kujundasid tekkinud fenotüübi. Kui 3T3-rakuliini hoiti tahtlikult hõredana ega lastud sellel kunagi saavutada konfluentsust – mille tulemusena tekkis äärmiselt tugeva kontaktinhibitsiooniga rakuliin –, siis suurema tihedusega kasvatatud rakuliinid kaotasid järk-järgult kontaktinhibitsiooni, moodustasid mitmekihilisi kihte ja saavutasid palju suurema küllastustiheduse. [1]. Seetõttu kirjeldatakse 3T6-t rakupankades kui kontakti poolt pärssimata liini, mis on selges vastanduses 3T3-ga. Nagu kõik selles uuringus kindlaks määratud hiireliinid, muutus ka 3T6 liini kariootüüp loomise käigus diploidseks heteroploidseks, jäädes hüpoteetraploidsesse vahemikku; andmebaasid teatavad ebastabiilsest kariootüübist, mille tüviliini kromosoomide arv on 78–81. Liin toodab kollageeni ja hüaluroonhapet, säilitades teatud sidekoe omadused, mis peegeldavad selle fibroblastilist päritolu. Liigi identiteet on kinnitatud tsütokroom c oksüdaasi 1. alarühma (COX1) geeni suunatud suure läbilaskevõimega sekveneerimise abil, mis annab hiire päritolu sõltumatu molekulaarse kinnituse. [2].

Teave rakukultuuri kohta

3T6-Swiss-albino rakkude eelised

3T6-Swiss-albiino rakkude üks praktilisemaid eeliseid on nende kiire paljunemistempo. Todaro ja Green dokumenteerisid, kuidas tekkiva 3T6-liini põlvnemisaeg lühenes 29 tunnist 15 tunnini kaheksa järjestikuse ülekande jooksul pärast seda, kui populatsioon oli muutunud täielikult heteroploiidseks, kusjuures samas liinis registreeriti väärtusi alla 14 tunni. [1]. Seetõttu märgivad rakupangad rakkude kahekordistumisaegaks umbes 15 tundi. See soodustab suure läbilaskevõimega eksperimentaalseid töövooge ja vähendab aega, mis kulub analüüsideks vajaliku rakukoguse saavutamiseks, samas kui rakkude kinnitumine ühekihiliseks kihiks hõlbustab nende lihtsat mikroskoopilist vaatlemist ja käsitsemist.

3T6-Swiss-albiino rakkude laialdane eksperimentaalne käsitletavus on teine oluline eelis. See rakuliin toetab stabiilset ja ajutist transfektsiooni mitmesuguste ekspressioonikonstruktidega, seda on kasutatud polüoomaviiruste produktiivseks paljundamiseks ning see reageerib usaldusväärselt ekstratsellulaarsetele stiimulitele, nagu kasvufaktorid ja purinergilised agonistid. Selline mitmekülgsus tähendab, et üksainus rakuliin suudab rahuldada mitmeid eksperimentaalseid vajadusi ühes laboris, vähendades seega vajadust hoida arvukaid erinevaid rakuvarusid. Lisaks on see liin osutunud kasulikuks mitmesugustes teadusvaldkondades – alates molekulaarviroloogiast kuni biomaterjalide testimiseni –, mis rõhutab selle laia rakendusala.

3T6-Swiss-albiino rakkude piirangud

3T6-Swiss-albiino rakud, mis on spontaanselt immortaliseeritud rakuliin, mis kaotas kasvatamise käigus kontaktinhibitsiooni, saavutavad palju suurema küllastustiheduse kui tavalised fibroblastid ning neil ei esine kontaktinhibitsiooniga kultuuridele omast tihedusest sõltuvat kasvu peatumist. [1]. Seetõttu ei jäljenda need rakuliinid sellistes liinides nagu 3T3 täheldatavaid kontaktinhibitsiooni reaktsioone, mis võib olla otsustava tähtsusega asjaolu, kui kavandatakse katseid, mille eesmärk on jäljendada normaalse koe füsioloogiat. Teadlased, kes uurivad kasvajate supressiooni, kinnitusest sõltuvat kasvu reguleerimist või normaalset haavade paranemist, peaksid olema ettevaatlikud selle rakuliini tulemuste tõlgendamisel. Kariotüüp on sellega seotud piirang: 3T6 on pigem heteroploidsed kui diploidsed, kromosoomide arv on ebastabiilne ja jääb hüpoteetraploidsesse vahemikku, mistõttu ei ole see sobiv taust uuringuteks, mis nõuavad euploidset genoomi.

Täiendav piirang on seotud mudeli hiirepäritolu, embrüonaalse ja fibroblastilise iseloomuga. 3T6-Swiss-albiino rakkudes saadud tulemusi ei pruugi olla võimalik otseselt üle kanda inimrakkude bioloogiale või diferentseerunud rakutüüpidele. Nagu kõigi püsivate rakuliinide puhul, võib pikaajalise passaažide arvu jooksul toimuv genoomiline triiv põhjustada fenotüübilist varieeruvust. Seetõttu soovitatakse regulaarset autentimist, et kinnitada liigi identiteeti ja avastada aja jooksul võimalikke ristsaastumisi. Tuleb märkida, et lühikeste tandemkorduste (STR) profiilide määramine, mis on inimrakkude puhul kuldstandard, ei ole siin kohaldatav; mitte-inimrakkude puhul on väljakujunenud meetodiks COX1-geeni DNA-vöötkoodimine ning 3T6 on autentifitseeritud just selle meetodi abil [2].

Vaata täielikke tehnilisi andmeid ja telli

Rakendused

Viroloogia ja viiruslike geenide ekspressioon

3T6-Šveitsi albiino rakud on juba mitu aastakümmet olnud produktiivne peremeesorganism polüomaviiruste uurimisel. Hyde-DeRuyscher ja Carmichael kasutasid NIH 3T6 rakke, et läbi viia üksikasjalikke tuuma-run-on-analüüse ja analüüsida polüomaviiruse geeniekspressiooni ajalist reguleerimist produktiivse nakkuse ajal [3]. Nende töö näitas, et polüomaviiruse varajase ja hilise faasi vahetust ei reguleeritud transkriptsiooni alguse tasandil. Selle asemel oli vahetus seotud muutustega RNA töötlemises – see avastus kujundas põhjalikult arusaama viirusgeenide regulatsioonist hiire fibroblastides.

Rhee ja Carmichael kasutasid NIH 3T6 nakkussüsteemi, et uurida polüomaviiruse hiliste mRNA-de translatsioonilist efektiivsust. Nad nakatasid rakke samaaegselt kahe viirusetüvega, mis erinesid üksteisest ainult oma 5'-mittekodeerivate hiliste liidre-eksoonide järjestuste poolest, ning isoleerisid polüsome nakkuse hilisematel ajapunktidel [4]. Nende polüsomide profiilide määramise katsed näitasid, et hilise liidri järjestus ei mõjutanud translatsiooni efektiivsust, andes olulise mehhanistliku ülevaate viirusliku mRNA kasutamisest.

Täiendavas uuringus identifitseerisid Chang ja kolleegid polüomaviiruse väikese kapsidvalgu VP2 C-terminaalses piirkonnas tuuma lokaliseerimissignaali (NLS), kasutades kahte üksteisele lähenevat strateegiat [5]. Geneetilise „subtraktiivse” lähenemise raames transfekteeriti COS-7 rakkudesse täispikkusega ja lühendatud VP2-konstruktsioone, mis näitasid, et aminohapete Glu307–Leu318 eemaldamine piiras VP2-d tsütoplasmasse. Biokeemiline „additiivne“ lähenemisviis tugines NIH 3T6-rakkudele: selle järjestusega vastav sünteetiline peptiid ristseostati veise seerumalbumiini ja immunoglobuliini G-ga, märgistati fluorestsentsmärgistusega ja mikroinjekteeriti 3T6-rakkude tsütoplasmasse, kus mõlemad konjugaadid kogunesid tuuma, samas kui konjugeerimata kandjavalkudest seda ei juhtunud. Seega oli 3T6-rakkude sobivus tsütoplasmaatiliseks mikroinjektsiooniks NLS-i kindlaksmääramisel kesksel kohal.

DNA parandamine ja kasvufaktorite signaaliedastus

3T6-Swiss-albiino rakke on laialdaselt kasutatud ioniseeriva kiirguse poolt põhjustatud DNA ahelalõhede parandamise ja kasvufaktorite rolli uurimiseks selle protsessi moduleerimisel. Bildin, Seregina ja Zhestyanikov uurisid üheahelaliste katkete (SSB) ja kaheahelaliste katkete (DSB) parandamise kineetikat Swiss 3T6-rakkudes, mida oli kiiritatud ioniseeriva kiirgusega doosides 5–10 Gy [6]. Ahelate katkestuste kvantifitseerimiseks kasutasid nad neutraalset ja aluselist elueerimist koos aluselise sahharoosi gradiendi tsentrifuugimisega. Nende tulemused näitasid, et seerumi puudumine vähendas parandamise kiirust järsult, samas kui uuesti stimuleerimine epidermaalse kasvufaktori (EGF) ja insuliiniga taastas need osaliselt, luues otsese seose mitogeense signaalimise ja DNA-kahjustuste parandamisvõime vahel.

Bil'dini, Seregina ja Zhestianikovi järgnev uuring laiendas seda tööd, iseloomustades spetsiifilisi DNA-polümeraase, mis osalevad kiirgusest tingitud SSB-parandamises proliferatsioonis olevates, puhkeolekus olevates ja mitogeeni poolt stimuleeritud Swiss 3T6 rakkudes [7]. Kasutades afidikoliini – DNA-polümeraaside alfa ja delta spetsiifilist inhibiitorit – ning 2',3'-didesoksütümidiin-5'-trifosfaati DNA-polümeraasi beeta inhibeerimiseks, leidsid nad, et SSB-parandus oli afidikoliini suhtes tundlikum sõltumata rakkude proliferatiivsest seisundist. Aphidikoliin pärssis DNA taastumist umbes kolm korda tugevamalt puhkeolekus ja mitogeeni poolt stimuleeritud rakkudes kui aktiivselt proliferatsioonis olevates rakkudes, viidates aphidikoliinile tundlikule polümeraasile – tõenäoliselt DNA-polümeraasile alfa – kui puhkeolekus olevate rakkude parandamist piiravale etapile.

Nukleotiidide ainevahetuse valdkonnas uurisid Tatibana ja kolleegid fosforibosüülpürofosfaadi (PRPP) kaudu nukleotiididesse suunduva ainevahetusvoo varajast mitogeenset stimuleerimist [8]. Töötades peamiselt Swiss 3T3-rakkudega, näitasid nad, et EGF koos insuliiniga suurendas PRPP kaudu toimuvat voolu ligikaudu kahekordselt ning et reaktsiooni toimumiseks oli vajalik välise magneesiumi sisenemine. Uinuvate Swiss 3T6 rakke uuriti koos inimese loote fibroblastidega ning need näitasid seerumiga kokkupuutel võrreldavat nukleotiidide sünteesi stimuleerimist, mis paigutas 3T6-rakud otse eksperimentaalse seeria raamidesse ja illustreeris, kuidas puriini ja pürimidiini de novo biosüntees aktiveeritakse varase reaktsioonina mitogeensele stimuleerimisele.

Rakutsükli regulatsioon ja diferentseerumine

Kleuseri ja Adami murranguline uuring võrdles otseselt Swiss 3T3- ja 3T6-rakke, et uurida seost ribosomaalse RNA sisalduse, raku suuruse ja rakutsükli sisenemise vahel [9]. Nende tulemused paljastasid kahe liini vahel põhimõttelise bioloogilise erinevuse: 3T3-rakud vajasid rakkude rRNA-sisalduse künnisväärtust enne rakutsükli taasalustamist, samas kui 3T6-rakud alustasid DNA replikatsiooni ilma rRNA olulise suurenemiseta. Seda erinevust tõlgendati tõendina, et 3T6-rakkude transformatsioon hõlmas lahtisidumist suurusekontrollpunktist, mis tavaliselt reguleerib rakutsükli algust, andes mehhanistliku ülevaate selle liini transformeeritud fenotüübist.

Thayer ja kolleegid näitasid, et müogeense determinatsiooni geeni MyoD1 transfektsioon aktiveerib endogeense MyoD1 geeni ekspressiooni, mis viitab positiivsele autoregulatsioonile [10]. Peamiseks eksperimentaalseks süsteemiks oli 10T1/2 liin, kuid mõju endogeensele MyoD1 mRNA-le kordus ka Swiss 3T6 rakkudes – tähelepanuväärselt oli see ainus täiendav liin mitmete testitud fibroblastide ja adipoblastide liinide hulgast, kus seda täheldati. See spetsiifilisus teeb 3T6-st informatiivse soodsa taustsüsteemi müogeense konversiooni uuringuteks. Sama töö näitas, et MyoD1 ja müogeeniin osalevad positiivses autoregulatoorses tsüklis, mis on mehhanistlik panus müogeense diferentseerumise mõistmisse ja avaldati ajakirjas „Cell“.

Chin ja Liem kasutasid Swiss 3T6 rakke, paralleelselt hiire L tk⁻ rakkudega, stabiilse transfektsiooni peremeesrakuna, et uurida roti neurofilamentvalkude NF-L ja NF-M ekspressiooni mitte-neuronaalses rakukontekstis [11]. Neurofilamentide cDNA-de ekspressiooni juhtisid SV40 ja Rousi sarkoomiviiruse promootorid, samas kui SV40 varajane promootor juhtis neomütsiini selektsioonimarkeri ekspressiooni. Nii NF-L-i kui ka NF-M-i konstruktidega saadi G418-resistentsed kloonid, kuid luua õnnestus vaid neid kloone, mis ekspresseerisid immunofluorestsentsiga tuvastatavat NF-M-i; immunoelektronmikroskoopia näitas, et NF-M kolokaliseerub vimentiiniga samadel vahefilamentidel. Eraldi kasutasid Gonzalez ja kolleegid Swiss 3T6 hiire fibroblaste, et iseloomustada kahte erinevat ATP-retseptori vahendatud signaaliteed, mis reguleerivad kaltsiumi väljavoolu ja plasmamembraani läbilaskvuse muutumist, näidates teede vahelist selektiivset desensitiseerumist, mis on kooskõlas mitmete purinoretseptorite olemasoluga nendes rakkudes [12].

Peremees-patogeeni vastasmõjud

3T6-Swiss-albiino rakud on osutunud tulemuslikuks in vitro mudeliks rakusiseste bakteriaalsete patogeenide, eriti Spiroplasma eriocheiris’e uurimiseks. Hou ja kolleegid näitasid, et S. eriocheiris suudab tungida 3T6-rakkudesse, moodustada inkluusiokehasid ja indutseerida vakuolisatsiooni, mida visualiseeriti immunofluorestsentsi ja transmissioonielektronmikroskoopia abil [13]. Voolutsütomeetria ja MTT-analüüsid kinnitasid, et nakkus indutseeris apoptoosi ja vähendas oluliselt rakkude eluvõimelisust. Nakatunud baktereid oli võimalik tuvastada juba üks tund pärast nakatumist ning nende arv suurenes järsult 12 tunni möödudes. Nakatunud 3T6-rakkude mRNA ja mikroRNA ekspressiooniprofiilide võrdlemine tuvastas kuue tunni möödudes 619 diferentsiaalselt ekspresseeritud transkripti ja 22 diferentsiaalselt ekspresseeritud miRNA-d, mis keskendusid fokaalsete adhesiivide ja MAPK signaaliteedele.

Selle interaktsiooni molekulaarseid mehhanisme on samas rakumudelis täiendavalt uuritud. Hou ja kolleegid identifitseerisid S. eriocheirise välismembraanil adhesiini-sarnase valgu (ALP) ning näitasid, et see on vajalik 3T6-Swiss-albiino rakkude nakatamiseks [14]. Pärmi kahehübriid-sõelumine, far-western-blotting ja kolokalisatsiooni eksperimendid tõestasid, et ALP seondub hiire valgu fibuliin-7 EGF-domeeniga ning et rekombinantne ALP pärsib 3T6-rakkudes EGFR-signaalitee aktiivsust, konkureerides EGF-ga – see on silmapaistev näide bakteriaalse pinnavalgu kasutamisest peremehe kasvufaktori teljel. Täiendavas uuringus iseloomustasid Zhu ja kolleegid S. eriocheirise lüsofosfolipaasi, märkides ära organismi võimet tungida hiire 3T6-rakkudesse ja seal ellu jääda, ning näitasid antikeha neutraliseerimise abil, et see ensüüm aitab kaasa virulentsusele nakkuse varases staadiumis [15]. Kokkuvõttes kinnitavad need uuringud, et 3T6-Swiss-albiino rakud on Spiroplasma-nakkuse uurimiseks korratav imetajate mudel.

Biomaterjalide hindamine ja biosensorite rakendused

3T6-Swiss-albiino rakkude jõuline kasv ja fibroblastilised omadused on muutnud need kasulikuks mudeliks uute biomaterjalide bioloogilise sobivuse hindamiseks. Rathinavel ja kolleegid hindasid haavade paranemise rakenduste jaoks elektrospun-meetodil valmistatud komposiit-nanokarkasse, mis sisaldasid mesopoorset ränidioksiidi (SBA-15), polükaprolaktooni ja kurkumiini [16]. Rakkude rännet, proliferatsiooni ja bioloogilist sobivust hinnati Swiss 3T6-rakkudes, kasutades rakkude adhesiiooni ja elusate/surnud rakkude analüüse, mis täiendasid antibakteriaalset testimist ja in vivo rottide haavamudelit. Uuring tõi esile 3T6-Swiss-albiino rakkude praktilise kasulikkuse haavade paranemise biomaterjalide kandidaatide sõelumisplatvormina.

Lisaks materjalide testimisele on 3T6-Swiss-albiino rakke kasutatud rakupõhiste biosensorite uurimisel. Nicolini ja kolleegid kasutasid räni-põhist potentsiomeetrilist vahelduvvoolu biosensorit (PAB) – valgustundlikku, pH-tundlikku andurikonfiguratsiooni –, et jälgida rakuvälise keskkonna hapestumise kiirust reaalajas ravimi toksilisuse näitajana [17]. Lisaks mitoksantrooniga ravitud rottide primaarsetele hepatotsüütidele ja HepG2-hepatoomirakkudele registreerisid autorid 3T6 hiire fibroblastide happestumise kiiruse muutusi pärast ravi DNA-antimetaboliidiga tsütarabiiniga (Ara-C) ning võrdlesid andurite näidud tavapärase optilise mikroskoopia, Neutral Red ja Trypan Blue analüüsid. See rakuliin sobis hästi nendele katsetele tänu oma ettearvatavale ainevahetusaktiivsusele ja lihtsale kasvatamisele andurisubstraatidel. Kokkuvõttes näitavad need rakendused, et 3T6-Swiss-albiino rakud täidavad kasulikku nišši translatsioonilises uurimistöös, ühendades rakubioloogiat ja materjaliteadust.

Järeldus

3T6-Swiss-albiino rakud (CVCL_0601) on märkimisväärselt mitmekülgne ja ajalooliselt oluline hiire fibroblastide rakuliin. Liini asutasid algselt Todaro ja Green 1963. aastal Šveitsi hiire embrüotest, kasutades kolmepäevast ülekanderežiimi, kus plaadile kanti 6 × 10⁵ rakku; selle kohta on kogunenud ulatuslik kirjandus, mis hõlmab viroloogiat, DNA-parandust, rakutsükli bioloogiat, müogeenset diferentseerumist, retseptori signaalimist, peremees-patogeeni interaktsioone ja biomaterjalide hindamist. Selle kiire kahekordistumisaeg, vastuvõtlikkus produktiivsele viirusnakkusele ning reageerimisvõime kasvufaktoritele ja mitogeenidele muudavad selle käepäraseks ja eksperimentaalselt paindlikuks mudelisüsteemiks. Olgu eesmärgiks siis polüomaviiruse transkriptsiooni uurimine, EGF poolt reguleeritud kiirgusest tingitud DNA-ahela murdude parandamise uurimine, uute haavade paranemist toetavate kandjate bioloogilise sobivuse hindamine või rakusisese bakteriaalse patogeneesi hindamine – 3T6-Swiss albino rakud pakuvad hästi valideeritud ja korratavat eksperimentaalplatvormi. Teadlased, kes soovivad seda rakuliini oma uurimisprogrammidesse kaasata, saavad tutvuda toote täielike spetsifikatsioonidega või tellida 3T6-Swiss albino rakke otse veebilehelt cytion.com.

Olulisemad publikatsioonid

1. Todaro GJ, Green H (1963) Hiire embrüo rakkude kasvu kvantitatiivsed uuringud kultuuris ja nende areng kindlaksmääratud liinideks. The Journal of Cell Biology. PMID: 13985244
2. Lung O, Candlish R, Nebroski M jt. (2021) Suure läbilaskevõimega sekveneerimine 63 rakuliini liigi autentimise ja saastumise avastamiseks. Scientific Reports. PMID: 34737324
3. Hyde-DeRuyscher R, Carmichael GG (1988) Polüomaviiruse varajase ja hilise faasi vaheldumist ei reguleerita transkriptsiooni alguse tasandil ning see on seotud muutustega RNA töötlemises. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. PMID: 2848251
4. Rhee E, Carmichael GG (1989) Polüomaviiruse hiliste mRNA-molekulide translatsiooniline efektiivsus, mis erinevad oma 5'-mittekodeerivate hiliste liidereksonide järjestuste poolest. Journal of Virology. PMID: 2535746
5. Chang D, Haynes JI 2nd, Brady JN, Consigli RA (1992) Tuuma lokaliseerimisjärjestuse identifitseerimine polüomaviiruse kapsidivalgu VP2-s. Virology. PMID: 1333132
6. Bildin VN, Seregina TB, Zhestyanikov VD (1990) Epidermaalse kasvufaktori (EGF) ja insuliini mõju kiirgusest tingitud DNA-kahjustuste parandamise kineetikale. Acta Biologica Hungarica. PMID: 2094129
7. Bil'din VN, Seregina TB, Zhestianikov VD (1992) DNA parandusprotsessi regulatsioon imetajate rakkudes. IV. DNA-polümeraaside roll epidermaalse kasvufaktori poolt reguleeritavas ioniseeriva kiirguse poolt indutseeritud ühe ahelaga DNA-murdude parandamises Swiss 3T6 hiirerakkudes. Tsitologiia (vene keeles; ingliskeelne kokkuvõte). PMID: 1295156
8. Tatibana M, Ishijima S, Kita K jt (1989) Metaboolse voo varajane mitogeenne stimuleerimine fosforibosüülpürofosfaadi kaudu nukleotiidideks Swiss 3T3 rakkudes ja välise magneesiumi vajadus selle reaktsiooni toimumiseks. Advances in Enzyme Regulation. PMID: 2483026
9. Kleuser B, Adam G (1985) Seos rakkude rRNA sisalduse ja normaalse ning transformeeritud hiire rakuliinide rakutsükli regulatsiooni vahel. Cell Biology International Reports. PMID: 3905022
10. Thayer MJ, Tapscott SJ, Davis RL, Wright WE, Lassar AB, Weintraub H (1989) Müogeense determinatsiooni geeni MyoD1 positiivne autoregulatsioon. Cell. PMID: 2546677
11. Chin SS, Liem RK (1989) Roti neurofilamentvalkude NF-L ja NF-M ekspressioon transfekteeritud mitte-neuronaalsetes rakkudes. European Journal of Cell Biology. PMID: 2516804
12. Gonzalez FA, Bonapace E, Belzer I, Friedberg I, Heppel LA (1989) Hiire Swiss 3T6 fibroblastides on võimalik eristada kahte erinevat ATP retseptorit nende desensitiseerumise järgi. Biochemical and Biophysical Research Communications. PMID: 2818584
13. Hou L, Gu W, Zhu H jt. (2017) Spiroplasma eriocheiris indutseerib hiire 3T6-Swiss albiino rakkudes apoptoosi, mis on seotud infektsioonimehhanismiga. Molecular Immunology. PMID: 28889064
14. Hou L, Liu Y, Gao Q jt. (2017) Spiroplasma eriocheirise adhesiinilaadne valk (ALP) suhtleb epidermaalse kasvufaktori (EGF) domeeni valkudega, et hõlbustada nakatumist. Frontiers in Cellular and Infection Microbiology. PMID: 28184355
15. Zhu H, Liu P, Du J jt. (2017) Spiroplasma eriocheirise lüsofosfolipaasi valgu identifitseerimine ja selle funktsiooni kinnitamine. Microbiology (Reading). PMID: 27926815
16. Rathinavel S, Korrapati PS, Kalaiselvi P, Dharmalingam S (2021) Mesopoorset ränidioksiidi sisaldav PCL/kurkumiini nanokiud haavade paranemise rakendamiseks. European Journal of Pharmaceutical Sciences. PMID: 34571179
17. Nicolini C, Lanzi M, Accossato P jt (1995) Ränipõhine biosensor reaalajas toksilisuse testimiseks tervete ja vähirakkude võrdluses. Biosensors and Bioelectronics. PMID: 7576440